本發(fā)明屬于荔枝繁育，具體涉及一種荔枝種苗繁育方法。
背景技術(shù)：
1、荔枝(litchi?chinensis)屬于無患子科(sapindaceae)荔枝屬(litchi)。荔枝樹為常綠喬木，15-28米高；其葉子為偶數(shù)羽狀復(fù)葉，互生，小葉通常3到6對，呈橢圓形或卵形，邊緣光滑；花朵為小型、黃綠色，聚集成圓錐花序；荔枝果實為核果，不僅美味且營養(yǎng)價值豐富，市場前景廣泛。
2、荔枝種苗常常采用嫁接繁殖和扦插繁殖，雖然現(xiàn)有方法可以確保新植株繼承母本的優(yōu)良性狀，但其時間較長且人工需求高，往往耗時耗力。同時由于荔枝胚胎誘導(dǎo)率低、再生植物頻率也低，因而荔枝的離體培養(yǎng)較為困難，嚴(yán)重制約了荔枝種苗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種荔枝種苗繁育方法，具有簡便且成活率高的特點(diǎn)。
2、本發(fā)明提供了一種培養(yǎng)基組合物，所述培養(yǎng)基組合物包括：第一培養(yǎng)基、第二培養(yǎng)基和第三培養(yǎng)基；
3、所述第一培養(yǎng)基由ms培養(yǎng)基、iba?0.5-1mg/l、kt?0.2-0.4mg/l、荔枝果肉提取物1-1.5ml/l、蔗糖25-30g/l和瓊脂5-7g/l組成；
4、所述第二培養(yǎng)基由ms培養(yǎng)基、6-ba?0.7-1mg/l、iba?0.2-0.3mg/l、鈉沸石粉0.05-0.1mg/l、蔗糖25-30g/l和瓊脂5-7g/l組成；
5、所述第三培養(yǎng)基由ms培養(yǎng)基、2,4-d?0.6-0.8mg/l、玉米素0.3-0.4mg/l、甘露醇80-100mg/l、活性炭3-5mg/l、蔗糖25-30g/l和瓊脂5-7g/l組成。
6、優(yōu)選的，所述荔枝肉提取物的制備方法包括：
7、將荔枝肉與水按照1g：10-12ml混合后依次進(jìn)行超聲提取和過濾，濾汁即為荔枝肉提取物。
8、優(yōu)選的，所述超聲提取的參數(shù)包括：溫度為20-25℃，時間為45-55min，功率為550-600w。
9、本發(fā)明提供了上述技術(shù)方案所述培養(yǎng)基組合物在荔枝種苗繁育中的應(yīng)用。
10、本發(fā)明提供了一種荔枝種苗繁育的方法，利用上述技術(shù)方案所述的培養(yǎng)基組合物進(jìn)行繁育，包括如下步驟：
11、將外植體進(jìn)行消毒，得到消毒后的外植體；
12、將所述消毒后的外植體依次接種于第一培養(yǎng)基、第二培養(yǎng)基和第三培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，得到無菌苗；
13、將所述無菌苗進(jìn)行煉苗移栽，得到荔枝種苗；
14、所述外植體包括：帶有腋芽的荔枝莖段。
15、優(yōu)選的，接種于所述第一培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的條件包括：溫度為23-25℃，光照強(qiáng)度為800-900lux，每天光照8-10h，時間為5-7d；
16、接種于所述第二培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的條件包括：溫度為23-25℃，光照強(qiáng)度為1000-1100lux，每天光照10-12h，時間為21-28d；
17、接種于所述第三培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的條件包括：溫度為23-25℃，光照強(qiáng)度為1200-1300lux，每天光照10-12h，時間為45-50d。
18、優(yōu)選的，所述消毒的過程包括：
19、將荔枝莖段依次利用體積濃度為70％-75％的乙醇溶液第一消毒30-45s，利用質(zhì)量濃度為0.1％的次氯酸鈉溶液進(jìn)行第二消毒15-20s，得到預(yù)處理后的外植體；
20、以無菌水清洗所述預(yù)處理后的外植體并晾干水分，得到消毒后的外植體。
21、優(yōu)選的，所述煉苗移栽的過程包括：
22、將無菌苗移栽至基質(zhì)中進(jìn)行煉苗培養(yǎng)，得到荔枝種苗；
23、所述基質(zhì)由珍珠巖、腐殖土、荔枝殼和枯草芽孢桿菌菌液按照質(zhì)量比20-30：20-30：5-8：0.5-0.8組成。
24、優(yōu)選的，所述枯草芽孢桿菌菌液的有效活菌數(shù)為＞1×107cfu/ml。
25、優(yōu)選的，所述煉苗培養(yǎng)的條件包括：
26、溫度為26-28℃，濕度為65％-70％，光照強(qiáng)度為1000-1200lux，每天光照10-12h。
27、有益效果：
28、本發(fā)明提供了一種培養(yǎng)基組合物，所述培養(yǎng)基組合物包括：第一培養(yǎng)基、第二培養(yǎng)基和第三培養(yǎng)基；所述第一培養(yǎng)基由ms培養(yǎng)基、iba?0.5-1mg/l、kt?0.2-0.4mg/l、荔枝果肉提取物1-1.5ml/l、蔗糖25-30g/l和瓊脂5-7g/l組成；所述第二培養(yǎng)基由ms培養(yǎng)基、6-ba0.7-1mg/l、iba?0.2-0.3mg/l、鈉沸石粉0.05-0.1mg/l、蔗糖25-30g/l和瓊脂5-7g/l組成；所述第三培養(yǎng)基由ms培養(yǎng)基、2,4-d?0.6-0.8mg/l、玉米素0.3-0.4mg/l、甘露醇80-100mg/l、活性炭3-5mg/l、蔗糖25-30g/l和瓊脂5-7g/l組成。在本發(fā)明中，通過將iba、kt和荔枝果肉提取物進(jìn)行組合，有利于誘導(dǎo)外植體進(jìn)行萌發(fā)；通過于第二培養(yǎng)基中添加6-ba、iba和鈉沸石粉，在降低組培褐化的基礎(chǔ)上，還促進(jìn)了荔枝莖段萌芽分化和發(fā)育，有利于得到活力高的小苗；通過添加2,4-d、玉米素、甘露醇和活性炭進(jìn)行生根培養(yǎng)，不僅提高嫩芽(淺綠色小苗)的生根率，還提升了后續(xù)荔枝種苗的存活率。因此，本發(fā)明提供的技術(shù)方案能夠應(yīng)用到荔枝種苗的繁育中。
1.一種培養(yǎng)基組合物，其特征在于，所述培養(yǎng)基組合物包括：第一培養(yǎng)基、第二培養(yǎng)基和第三培養(yǎng)基；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基組合物，其特征在于，所述荔枝肉提取物的制備方法包括：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)基組合物，其特征在于，所述超聲提取的參數(shù)包括：溫度為20-25℃，時間為45-55min，功率為550-600w。
4.權(quán)利要求1-3任一項所述培養(yǎng)基組合物在荔枝種苗繁育中的應(yīng)用。
5.一種荔枝種苗繁育的方法，其特征在于，利用權(quán)利要求1-3任一項所述的培養(yǎng)基組合物進(jìn)行繁育，包括如下步驟：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，接種于所述第一培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的條件包括：溫度為23-25℃，光照強(qiáng)度為800-900lux，每天光照8-10h，時間為5-7d；
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述消毒的過程包括：
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述煉苗移栽的過程包括：
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌菌液的有效活菌數(shù)為＞1×107cfu/ml。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述煉苗培養(yǎng)的條件包括：