本申請涉及生物醫(yī)藥,更具體地說,它涉及一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液。
背景技術:
1、豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒(prv)感染引起豬的一種急性、高度接觸性傳染病,該病是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一。該病通常依靠預防、防止病毒輸入、注射疫苗并采用pr凈化的手段進行治療。其中,注射疫苗有:豬偽狂犬病滅活疫苗、偽狂犬病活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗。
2、豬偽狂犬活疫苗是用人工致弱的偽狂犬病病毒株制成的疫苗。疫苗接種后,病毒在豬體內能夠有限度地增殖,刺激機體的免疫系統(tǒng)產生免疫反應,包括產生特異性抗體和激活細胞免疫,從而使豬獲得對偽狂犬病病毒的免疫力,當豬再次接觸到病毒時,免疫系統(tǒng)能夠迅速識別并清除病毒,保護豬不發(fā)病?;钜呙缡褂脮r需要用稀釋液進行稀釋,接種疫苗是預防豬偽狂犬病的主要措施,但免疫過程中造成免疫波動的因素有很多,使用不同組分的疫苗稀釋液對免疫效果也起到重要的作用。傳統(tǒng)活疫苗稀釋液多為磷酸鹽緩沖液或者生理鹽水,沒有免疫增強作用,因此,本申請?zhí)岢鲆环N豬偽狂犬活疫苗用稀釋液,可以顯著增強豬偽狂犬活疫苗的穩(wěn)定性和免疫效應。
技術實現(xiàn)思路
1、為了解決現(xiàn)有技術中,傳統(tǒng)活疫苗稀釋液不具備免疫增強作用的問題,本申請?zhí)峁┝艘环N豬偽狂犬活疫苗用稀釋液。
2、第一方面,本申請?zhí)峁┝艘环N豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,具體包括以下的步驟:
3、將磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、氯化鈣、氯化鈉、中藥提取物、穩(wěn)定劑和水攪拌溶解,高壓蒸汽滅菌得豬偽狂犬活疫苗用稀釋液。
4、優(yōu)選的,所述磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、氯化鈣、氯化鈉、中藥提取物、穩(wěn)定劑和水的質量比為7-9:13-15:3-5:8-10:10-12:3-5:1000。
5、優(yōu)選的,所述中藥提取物由以下方法制得:
6、s1、將茯苓和金銀花攪拌混合,粉碎過篩,加入乙醇溶液,攪拌混合,再加入纖維素酶進行酶解,得功能溶液;
7、s2、將殼聚糖與稀醋酸溶液攪拌混合1-2h,形成殼聚糖溶液;
8、s3、將功能溶液與殼聚糖溶液攪拌混合,再加入單寧酸,控制溫度為30-35℃,繼續(xù)攪拌混合,噴霧干燥得中藥提取物。
9、優(yōu)選的,所述步驟s1中,茯苓、金銀花、乙醇溶液和纖維素酶的質量比為11-15:6-8:50:0.03-0.05。
10、優(yōu)選的,所述步驟s1中乙醇溶液的質量濃度為60%-70%。
11、優(yōu)選的,所述步驟s1中酶解溫度為40-50℃,時間為1-3h。
12、優(yōu)選的,所述步驟s2中殼聚糖與稀醋酸溶液的質量比為1-3:50。
13、優(yōu)選的,所述步驟s2中稀醋酸溶液的質量濃度是1%-3%。
14、優(yōu)選的,所述步驟s3中,功能溶液、殼聚糖溶液和單寧酸的質量比為10-20:5-10:1-3。
15、優(yōu)選的,所述穩(wěn)定劑由明膠、環(huán)糊精和牛血清白蛋白按質量比3-7:2-4:2混合組成。
16、第二方面,本申請?zhí)峁┝艘环N豬偽狂犬活疫苗用稀釋液,由以上所述方法制得。
17、綜上所述,本申請具有以下有益效果:
18、1.本申請采用合理的原料搭配和制備工藝,通過加入中藥提取物和穩(wěn)定劑,使制備的豬偽狂犬活疫苗用稀釋液具備良好的穩(wěn)定性和免疫增強作用,可以顯著提高豬偽狂犬活疫苗的免疫效應,有效刺激免疫應答,增強免疫效果。
19、2.本申請中藥提取物以茯苓和金銀花為原料提取活性成分,并與殼聚糖和單寧酸進一步反應制得。茯苓中含有茯苓多糖,能夠增強巨噬細胞的吞噬能力,激活補體系統(tǒng),促進淋巴細胞的轉化,調節(jié)免疫細胞因子的產生,金銀花中的綠原酸等成分能提高白細胞的吞噬能力,二者可以產生協(xié)同作用,更全面地增強免疫細胞的活性和功能,以及調節(jié)免疫因子的分泌和平衡,使機體的免疫應答更加精準和有效。殼聚糖可以在中藥提取物表面形成一層均勻的保護膜,提高中藥活性成分的穩(wěn)定性和藥效持久性,單寧酸的加入一方面可以和殼聚糖產生交聯(lián)作用,形成穩(wěn)定的網(wǎng)絡結構,進一步提高中藥提取物的穩(wěn)定性,另一方面單寧酸可以與疫苗中的抗原蛋白形成復合物,穩(wěn)定抗原結構,提高疫苗的免疫原性以及激活抗原呈遞細胞,提高疫苗的免疫效果。
20、3.本申請將明膠、環(huán)糊精和牛血清白蛋白復配作為穩(wěn)定劑。一方面明膠可以形成膠體溶液包裹抗原,牛血清白蛋白能在抗原表面形成保護膜,兩者協(xié)同作用,減少抗原分子之間的相互碰撞和聚集,提高抗原的物理穩(wěn)定性,另一方面牛血清白蛋白含有具有抗氧化作用的氨基酸殘基,明膠中的某些成分也具有一定的抗氧化性能,環(huán)糊精可以減少引發(fā)氧化反應的物質與抗原的接觸,三者復配可以有效提高稀釋液中抗原的抗氧化能力,增強其化學穩(wěn)定性。明膠、環(huán)糊精和牛血清白蛋白三者復配可以協(xié)同提高抗原的穩(wěn)定性,從而提高疫苗的免疫效應。
1.一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,具體包括以下的步驟:
2.根據(jù)權利要求1所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、氯化鈣、氯化鈉、中藥提取物、穩(wěn)定劑和水的質量比為7-9:13-15:3-5:8-10:10-12:3-5:1000。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述中藥提取物由以下方法制得:
4.根據(jù)權利要求3所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述步驟s1中,茯苓、金銀花、乙醇溶液和纖維素酶的質量比為11-15:6-8:50:0.03-0.05。
5.根據(jù)權利要求3所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述步驟s1中乙醇溶液的質量濃度為60%-70%。
6.根據(jù)權利要求3所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述步驟s1中酶解溫度為40-50℃,時間為1-3h。
7.根據(jù)權利要求3所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述步驟s2中殼聚糖與稀醋酸溶液的質量比為1-3:50。
8.根據(jù)權利要求3所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述步驟s3中,功能溶液、殼聚糖溶液和單寧酸的質量比為10-20:5-10:1-3。
9.根據(jù)權利要求1所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法,其特征在于,所述穩(wěn)定劑由明膠、環(huán)糊精和牛血清白蛋白按質量比3-7:2-4:2混合組成。
10.一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液,其特征在于,由權利要求1-9任意一項所述的一種豬偽狂犬活疫苗用稀釋液的制備方法制得。