本公開(kāi)涉及從植物如從枸杞中提取外泌體的方法、該方法提取的植物外泌體，含有其的組合物，及其在皮膚領(lǐng)域中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、外泌體是由細(xì)胞分泌的具有磷脂雙分子層的一種納米顆粒，直徑通常在30-200nm，含有豐富的蛋白質(zhì)和核酸物質(zhì)等。外泌體能在細(xì)胞間傳遞蛋白、mrna、microrna等活性物質(zhì)，參與許多重要的生理、病理過(guò)程，其獨(dú)特作用已經(jīng)受到越來(lái)越多的業(yè)內(nèi)關(guān)注。

2、目前，外泌體主要從乳源樣品、各種細(xì)胞培養(yǎng)上清液、腫瘤組織的滲出液等材料中獲取。但是，從細(xì)胞培養(yǎng)上清液等來(lái)源中獲取外泌體的材料來(lái)源有限、成本較高，所獲得的外泌體含量低，提純后的成本更高，這就制約了外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

3、各種植物也是外泌體的重要來(lái)源，且植物來(lái)源的外泌體樣納米顆粒(plantderived?exosome-like?nanoparticles，pen)的提取率遠(yuǎn)高于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物的提取率，表明其作為納米工廠(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效力[1]。最重要的是，最近的研究表明植物外泌體可以被腸道巨噬細(xì)胞吸收，發(fā)揮細(xì)胞間通訊和免疫調(diào)節(jié)的作用[2-3]。

4、正確的提取和純化方法對(duì)于外泌體的分析至關(guān)重要，因?yàn)樗鼈兺ǔ４嬖谟谶^(guò)于復(fù)雜的基質(zhì)中。外泌體提取方法的研究不僅要考察提取物的特異性和純度，還需要考慮操作的簡(jiǎn)單性和規(guī)模效率。目前，分離外泌體較多使用的方法包括超速離心法、聚合物沉淀法、凝膠排阻法、抗體親和沉淀法、密度梯度離心法、膜過(guò)濾等。但是每種方法都有其缺陷，比如超速離心法操作繁雜、技術(shù)難度高、耗時(shí)，分離的外泌體可能因高速離心而受損，且含有大量雜蛋白；聚合物沉淀法提取的外泌體缺乏特異性和選擇性，純度低；凝膠排阻法的技術(shù)難度較高，但難以保證分離的外泌體無(wú)菌，耗時(shí)且難以規(guī)?；?；免疫親和層析通常會(huì)提高樣品的純度但會(huì)降低效率和回收率；而膜過(guò)濾提高效率和回收率但會(huì)降低其樣品特異性和純度[4]。

5、通常，哺乳動(dòng)物來(lái)源的外泌體從生物體液中分離出來(lái)，而植物來(lái)源的外泌體則從質(zhì)外體洗滌液中分離出來(lái)。對(duì)于哺乳動(dòng)物來(lái)源的外泌體，目前其分離和純化技術(shù)主要包括微流體技術(shù)，超速離心方法、基于外泌體尺寸的分離技術(shù)、沉淀技術(shù)、和免疫親和捕獲技術(shù)，而用于分離和純化植物來(lái)源的外泌體的可用方法主要基于用于哺乳動(dòng)物來(lái)源的外泌體的既定技術(shù)，但具有不同程度缺點(diǎn)。例如，對(duì)于差速離心，由于植物和動(dòng)物之間的生理差異，通過(guò)這種方法獲得的植物來(lái)源的外泌體經(jīng)常混合有蛋白質(zhì)、核酸聚集體和其他囊泡，因而需要進(jìn)一步使用密度梯度超速離心進(jìn)行進(jìn)一步純化以分離污染物。再例如，由于植物汁液中存在高分子量成分，例如纖維素和淀粉，其通常會(huì)導(dǎo)致離心困難，因而，需要使用各種離心方法的組合(例如差速離心與蔗糖密度梯度離心相結(jié)合)以解決傳統(tǒng)離心技術(shù)的上述缺點(diǎn)。此外，雖然其他幾種分離技術(shù)，如免疫親和捕獲、超濾或尺寸排阻色譜(sec)、共沉淀方法和微流體技術(shù)已成功應(yīng)用于哺乳動(dòng)物來(lái)源的外泌體，但是對(duì)于植物來(lái)源的外泌體的分離并不理想。例如，雖然基于形成針對(duì)細(xì)胞外囊泡表面抗原的免疫復(fù)合物的免疫親和捕獲是純化哺乳動(dòng)物細(xì)胞外泌體的理想方法，但是，對(duì)于植物來(lái)源的外泌體，有關(guān)植物來(lái)源的外泌體的標(biāo)記蛋白和特征抗體的不足限制了該技術(shù)的應(yīng)用。因此，適于哺乳動(dòng)物外泌體提取的方法并不適用于植物外泌體的提取。

6、植物外泌體的分離缺乏通用的方法，目前研究中常用的是超速離心方法，或者組合多種手段如萃取、膜過(guò)濾除雜、微濾除菌、納濾濃縮、甚至輔之以絡(luò)合反應(yīng)來(lái)獲得植物外泌體[7]。如上文所述，盡管超速離心法通常被認(rèn)為是外泌體分離的金標(biāo)準(zhǔn)，可以分離出相對(duì)純的外泌體[5]，但超速離心方法具有諸多缺陷，且依賴(lài)于超高速離心力和持續(xù)時(shí)間、通過(guò)將顆粒沉降到底部到達(dá)分離的目的，因此耗時(shí)且提取規(guī)模受限于超速離心機(jī)的處理體積。

7、皮膚是抵御細(xì)菌和紫外線(xiàn)等外部刺激的重要保護(hù)屏障，皮膚屏障主要由角質(zhì)層和角質(zhì)形成細(xì)胞組成，其主要功能是保護(hù)體內(nèi)組織和液體不受外界環(huán)境影響[8]。紫外線(xiàn)的照射會(huì)導(dǎo)致皮膚的角質(zhì)層受到損傷，細(xì)胞內(nèi)屏障蛋白表達(dá)下降，從而使皮膚屏障功能受損[9]。同時(shí)皮膚也是紫外線(xiàn)誘導(dǎo)氧化損傷的靶器官，uvb所攜帶的能量可以活化皮膚中內(nèi)源的光敏性物質(zhì)，產(chǎn)生單態(tài)氧、氧自由基、過(guò)氧化氫等多種活性氧[10]。因此，抑制紫外線(xiàn)誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)活性氧反應(yīng)以及滲透性皮膚屏障破壞是抵擋皮膚光老化及皮膚病變的關(guān)鍵要素之一。

8、枸杞是一種常用的中藥成分[11]。它含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，包括胡蘿卜素、維生素a、鈣和鐵。通常，外泌體主要負(fù)責(zé)細(xì)胞間的物質(zhì)傳遞，從而進(jìn)一步調(diào)控多種生理機(jī)制，包括免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)[12]–[14]。然而，尚未發(fā)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)告由枸杞中來(lái)提取外泌體，更沒(méi)有研究其對(duì)皮膚屏障損傷和抗氧化方面具有有益作用。

9、因此，需要一種簡(jiǎn)單高效、適合于工業(yè)化水平的大規(guī)模分離提取高純度植物外泌體的方法，以實(shí)現(xiàn)外泌體生產(chǎn)成本降低和產(chǎn)量提高，同時(shí)該外泌體具有對(duì)皮膚的有益效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為克服現(xiàn)有技術(shù)中植物外泌體提取方法的欠缺和不足，發(fā)明人首次提出一種使用逐層過(guò)濾來(lái)分離提取植物外泌體的方法，該方法簡(jiǎn)單、高效、適合于工業(yè)化規(guī)模(如圖1所示)，且分離提純的外泌體具有較高的純度。

2、具體地，本公開(kāi)使用逐層過(guò)濾和超速離心兩種方法，從枸杞中分離得到植物外泌體。通過(guò)分析分離所得植物外泌體的物理特性和功效，并結(jié)合植物代謝組學(xué)分析，比較兩種方法提取的植物外泌體的區(qū)別，并由此篩選出一種適合于植物外泌體分離提取的方法。

3、研究結(jié)果表明，與超速離心的方法相比，逐層過(guò)濾處理相同質(zhì)量植物原料的時(shí)間縮短3倍，產(chǎn)量提高了至少40倍，且代謝組學(xué)分析顯示，逐層過(guò)濾分離提取的植物外泌體含有更多的活性代謝物。當(dāng)植物原料放大10倍甚至20倍時(shí)，逐層過(guò)濾分離提取的植物外泌體的方法優(yōu)勢(shì)更加明顯。此外，逐層過(guò)濾分離提取的植物外泌體具有典型的外泌體樣茶托形狀，蛋白含量豐富，并且在體外具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)的功能活性。

4、具體地，本公開(kāi)的逐層過(guò)濾方法相比于超速離心具有更低時(shí)間消耗，具有更高的外泌體產(chǎn)量或粒子濃度，能防止因雜質(zhì)過(guò)多導(dǎo)致的濾膜堵塞，且能保證產(chǎn)物無(wú)菌。使用本公開(kāi)的逐層過(guò)濾方法提取的植物外泌體具有典型的外泌體樣的茶托形狀，粒徑在30-200nm范圍內(nèi)，并顯示出優(yōu)異的抗炎和免疫調(diào)節(jié)活性。

5、本公開(kāi)的植物外泌體提取方法提適于大規(guī)模生產(chǎn)；優(yōu)選地，所述方法可以通過(guò)增加過(guò)濾的膜面積從而處理大規(guī)模生產(chǎn)所對(duì)應(yīng)的植物材料的量，例如質(zhì)量為至少約100g、200g、300g、400g、500g、600g、700g、800g、900g、1000g、2000g、3000g、4000g、5000g、6000g、7000g、8000g、9000g、10000g、50000g，甚至100000g的植物材料。

6、因此，一方面，本公開(kāi)提供一種分離提取植物外泌體的方法，具體地通過(guò)深層過(guò)濾分離提取植物外泌體的方法，所述方法包括以下步驟：

7、(a)獲得植物材料；

8、(b)對(duì)獲得的植物材料進(jìn)行預(yù)處理，獲得植物粗提取液；和

9、(c)對(duì)獲得的植物粗提取液進(jìn)行逐層過(guò)濾處理，

10、其中，在步驟(c)中，所述逐層過(guò)濾處理包括深層過(guò)濾步驟，以及任選地膜過(guò)濾步驟。

11、在一種本公開(kāi)的分離提取植物外泌體的方法實(shí)施方案中，在步驟(c)中，所述逐層過(guò)濾步驟包括使用深層過(guò)濾，優(yōu)選地，所述深層過(guò)濾采用約1-50μm孔徑的深層過(guò)濾，更優(yōu)選為約2-30μm孔徑的深層過(guò)濾。在具體的實(shí)施方案中，在步驟(c)中，所述逐層過(guò)濾步驟包括深層過(guò)濾步驟，所述深層過(guò)濾步驟使用深層囊式過(guò)濾(優(yōu)選具有約1-50μm孔徑)，更優(yōu)選所述深層囊式過(guò)濾為具有約2-30μm孔徑的深層囊式過(guò)濾。

12、在具體的實(shí)施方案中，在步驟(c)中，所述深層過(guò)濾步驟包括使用深層過(guò)濾器，優(yōu)選地，所述深層過(guò)濾器為具有約1-50μm孔徑的深層過(guò)濾器，更優(yōu)選為具有2-30μm孔徑的深層過(guò)濾器。在具體的實(shí)施方案中，所述深層過(guò)濾器為具有1-50μm孔徑的深層囊式過(guò)濾器，更優(yōu)選為具有約2-30μm孔徑的深層囊式過(guò)濾器，例如，適用的深層囊式過(guò)濾器包括頗爾公司(pall?corporation，ny)生產(chǎn)的深層過(guò)濾器，例如為supracaptmdepth?filter?capsules。

13、在一種本公開(kāi)的分離提取植物外泌體的方法實(shí)施方案中，所述逐層過(guò)濾還包括在深層過(guò)濾步驟之后進(jìn)行的至少一個(gè)膜過(guò)濾步驟，優(yōu)選地，所述膜過(guò)濾包括防堵塞膜過(guò)濾，或者還進(jìn)一步包括除菌膜過(guò)濾，例如進(jìn)行孔徑在約0.4-0.8μm的防堵塞膜過(guò)濾和/或孔徑在約0.1-0.3μm的除菌膜過(guò)濾，更優(yōu)選地，膜過(guò)濾包括約0.45-0.8μm的膜過(guò)濾和約0.1-0.22μm的膜過(guò)濾，最優(yōu)選地，膜過(guò)濾由依次進(jìn)行的約0.45μm的防堵塞膜過(guò)濾和約0.22μm的除菌膜過(guò)濾組成。

14、在一種本公開(kāi)的分離提取植物外泌體的方法實(shí)施方案中，所述深層過(guò)濾、0.45μm的膜過(guò)濾和0.22μm的膜過(guò)濾的流速為約20-1000ml/min，例如約20-500ml/min、約20-200ml/min、約30-100ml/min。

15、在一種本公開(kāi)的分離提取植物外泌體的方法實(shí)施方案中，所述步驟(c)的逐層過(guò)濾由本公開(kāi)一般或具體或優(yōu)選定義的深層過(guò)濾和本公開(kāi)一般或具體或優(yōu)選定義的膜過(guò)濾組成。

16、在一種本公開(kāi)的分離提取植物外泌體的方法實(shí)施方案中，在步驟(b)中，所述預(yù)處理包括混合、粉碎、研磨、攪拌、過(guò)濾、離心中的一種或多種，以獲得植物粗提取物。在具體的實(shí)施方案中，所述預(yù)處理包括混合、粉碎、過(guò)濾和離心。

17、在具體的實(shí)施方案中，所述步驟(b)中的混合使用水性溶液，例如水溶液；優(yōu)選地，所述水溶液為等滲水溶液；更優(yōu)選地，所述等滲水溶液為等滲氯化鈉水溶液，例如氯化鈉注射液。

18、在具體的實(shí)施方案中，所述步驟(b)可以在任何合適的溫度進(jìn)行。例如，所述步驟(b)可以在以下溫度進(jìn)行：約0℃、1℃、2℃、3℃、4℃、5℃、6℃、7℃、8℃、9℃、10℃、11℃、12℃、13℃、14℃、15℃、16℃、17℃、18℃、19℃、20℃、25℃、30℃、35℃或40℃，或者約0℃至約40℃內(nèi)的任意子范圍(例如，任意兩個(gè)上述溫度之間的任意范圍)，優(yōu)選約2-30℃、較優(yōu)選2-20℃，更優(yōu)選2-8℃，最優(yōu)選4℃。在一些實(shí)施方案中，可以在環(huán)境溫度(例如25℃)下進(jìn)行本公開(kāi)的所述步驟(b)。

19、在本公開(kāi)的方法實(shí)施方案中，所述植物材料可以是陸生或水生的。優(yōu)選地，所述植物材料選自枸杞、人參、石斛、和/或當(dāng)歸。

20、另一方面，本公開(kāi)提供一種植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)，其通過(guò)前述一般或優(yōu)選定義的方法實(shí)施方案所制備，或源自枸杞、人參、石斛、和/或當(dāng)歸；優(yōu)選地，所述外泌體具有約30-450nm的直徑，優(yōu)選約30-250nm的直徑，更優(yōu)選具有約30-200nm的直徑；和/或所述外泌體具有茶托形狀；和/或所述外泌體與超速離心方法所制備的植物外泌體相比在以下一個(gè)或多個(gè)方面具有更多的代謝物：脂質(zhì)和脂質(zhì)樣分子、有機(jī)氧化合物、苯丙烷和聚酮、有機(jī)雜環(huán)化合物、有機(jī)酸及其衍生物和/或苯類(lèi)化合物。

21、另一方面，本公開(kāi)提供一種植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)組合物，例如外泌體溶液，包含通過(guò)本公開(kāi)一般或優(yōu)選定義的方法制備的植物外泌體，以及任選的適合的賦形劑或載體，所述賦形劑或載體就營(yíng)養(yǎng)保健、藥學(xué)、食品、皮膚病學(xué)和/或化妝品而言是可接受的。

22、在一種具體的實(shí)施方案中，所述外泌體組合物是藥物組合物。在具體的實(shí)施方案中，所述外泌體組合物包含本公開(kāi)方法制備的枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體中的至少一種；和任選的藥學(xué)上可接受的載體。

23、另一方面，本公開(kāi)提供一種組合物，其包含枸杞外泌體；可選地所述組合物還包含人參外泌體，和/或當(dāng)歸外泌體；優(yōu)選地所述組合物不含有石斛外泌體。

24、另一方面，本公開(kāi)提供一種組合物，其包含枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體中的任意一種、任意兩種、任意三種、或者四種。

25、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體和人參外泌體。

26、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體和當(dāng)歸外泌體。

27、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體、當(dāng)歸外泌體和人參外泌體。

28、在一種具體的實(shí)施方案中，所述枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體中的至少一種是通過(guò)本公開(kāi)的方法制備得到，或分別源自枸杞、人參、石斛、當(dāng)歸。

29、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體，其中任意兩種外泌體之間的粒子數(shù)比例范圍為約1:1010-1010:1，例如為約1:109-109:1、1:108-108:1、1:107-107:1、1:106-106:1、1:105-105:1、1:104-104:1、1:103-103:1、1:102-102:1、1:10-10:1、1:9-9:1、1:8-8:1、1:7-7:1、1:6-6:1、1:5-5:1、1:4-4:1、1:3-3:1、1:2-2:1或1:1。

30、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體和當(dāng)歸外泌體，其中枸杞外泌體的粒子數(shù)與當(dāng)歸外泌體的粒子數(shù)的比例為約1010:1、109:1、108:1、107:1、106:1、105:1、104:1、103:1、102:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:102、1:103、1:104、1:105、1:106、1:107、1:108、1:109、1:1010。

31、在一種具體的實(shí)施方案中，枸杞外泌體的粒子數(shù)與當(dāng)歸外泌體的粒子數(shù)的比例范圍為約至少1:1，優(yōu)選枸杞外泌體的粒子數(shù)與當(dāng)歸外泌體的粒子數(shù)的比例為約1:1。

32、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體和人參外泌體，其中枸杞外泌體的粒子數(shù)與人參外泌體的粒子數(shù)的比例為約1010:1、109:1、108:1、107:1、106:1、105:1、104:1、103:1、102:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、1:102、1:103、1:104、1:105、1:106、1:107、1:108、1:109、1:1010。

33、在一種具體的實(shí)施方案中，枸杞外泌體的粒子數(shù)與人參外泌體的粒子數(shù)的比例范圍為約至少1:1。

34、在一種具體的實(shí)施方案中，枸杞外泌體的粒子數(shù)與人參外泌體的粒子數(shù)的比例為約1:1。

35、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體和人參外泌體，其中該組合物相比每種組分的外泌體具有提高的皮膚修護(hù)作用或?qū)寡趸饔?，?yōu)選地枸杞外泌體與人參外泌體的粒子數(shù)比例為約3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4，例如1:1。

36、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體和當(dāng)歸外泌體，其中該組合物相比每種組分的外泌體具有提高的皮膚修護(hù)作用或?qū)寡趸饔茫瑑?yōu)選地枸杞外泌體與當(dāng)歸外泌體的粒子數(shù)比例為約3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4，例如1:1。

37、在一種具體的實(shí)施方案中，所述組合物包含枸杞外泌體、當(dāng)歸外泌體和人參外泌體，且枸杞外泌體、當(dāng)歸外泌體和人參外泌體之間的粒子數(shù)比例為約1:1:1。

38、另一方面，本公開(kāi)提供一種植物外泌體組合物，包含根據(jù)本公開(kāi)的方法制備的植物外泌體或組合物，以及任選地適合的賦形劑或載體。

39、在一種具體的實(shí)施方案中，所述植物外泌體組合物為藥物組合物、食品組合物、美容或化妝品組合物或營(yíng)養(yǎng)保健組合物。

40、在一種具體的實(shí)施方案中，所述外泌體組合物是食品組合物，其包含通過(guò)本公開(kāi)一般或優(yōu)選定義的方法所制備的植物外泌體，以及任選的其他食物成分和/或可食用賦形劑和/或載體。在具體的實(shí)施方案中，所述食品組合物包含由本公開(kāi)方法所制備的枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體中的至少一種，以及任選的其他食物成分和/或可食用賦形劑和/或載體。在一種具體的實(shí)施方案中，所述外泌體組合物是美容(或化妝品)組合物，其包含通過(guò)本公開(kāi)一般或優(yōu)選定義的方法所制備的植物外泌體，以及任選地美容/化妝品可接受的賦形劑或載體。在具體的實(shí)施方案中，所述美容性組合物包含由本公開(kāi)方法所制備的枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體中的至少一種，以及至少一種美容/化妝品可接受的賦形劑或載體。

41、在一種具體的實(shí)施方案中，所述外泌體組合物是營(yíng)養(yǎng)保健組合物，其包含通過(guò)本公開(kāi)一般或優(yōu)選定義的方法所制備的植物外泌體，以及任選地營(yíng)養(yǎng)保健可接受的賦形劑或載體。在具體的實(shí)施方案中，所述營(yíng)養(yǎng)保健組合物包含由本公開(kāi)方法所制備的枸杞外泌體、人參外泌體、石斛外泌體和當(dāng)歸外泌體中的至少一種，以及至少一種營(yíng)養(yǎng)保健可接受的賦形劑或載體。另一方面，本公開(kāi)還提供由本公開(kāi)方法所制備的植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)或包含其的組合物(包括但不限于藥物組合物/食品組合物/美容或化妝品組合物/營(yíng)養(yǎng)保健組合物)的用途，其用于治療或預(yù)防—或有助于(或輔助用于)改善、緩解或控制—炎癥、優(yōu)選皮膚炎癥，或在皮膚學(xué)領(lǐng)域用于—或輔助用于—修護(hù)、抗炎、抗氧化、抗衰老、美白或保濕。

42、另一方面，本公開(kāi)還提供由本公開(kāi)方法所制備的植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)或包含其的組合物(包括但不限于藥物組合物/食品組合物/美容組合物/營(yíng)養(yǎng)保健組合物)在制備產(chǎn)品(藥物、食品、營(yíng)養(yǎng)保健品、美容/化妝品等)中的用途，所述產(chǎn)品用于治療或預(yù)防—或有助于(或輔助用于)改善、緩解或控制—炎癥、優(yōu)選皮膚炎癥，或在皮膚學(xué)領(lǐng)域用于或輔助用于修護(hù)、抗炎、抗氧化、抗衰老、美白或保濕。

43、另一方面，本公開(kāi)提供一種治療或預(yù)防炎癥、優(yōu)選皮膚炎癥、或治療或預(yù)防皮膚學(xué)癥狀、或輔助用于改善、緩解或控制皮膚學(xué)癥狀的方法，其包括向有需要的對(duì)象施用通過(guò)前述一般或優(yōu)選定義的方法所制備的植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)或包含其的組合物(藥物組合物/食品組合物/美容或化妝品組合物/營(yíng)養(yǎng)保健組合物)。

44、另一方面，本公開(kāi)提供上述植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)或植物外泌體組合物在生物醫(yī)藥或藥物遞送系統(tǒng)中的用途。

45、另一方面，本公開(kāi)還提供制備藥物、食品、營(yíng)養(yǎng)保健品、美容/化妝品組合物的方法，包括根據(jù)本公開(kāi)一般或優(yōu)選定義的方法制備得到植物外泌體(優(yōu)選枸杞外泌體)，并將所述植物外泌體摻入所述藥物、食品、營(yíng)養(yǎng)保健品、美容/化妝品組合物中。