本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥和植物保護領(lǐng)域，涉及能夠引誘斜紋夜蛾成蟲的關(guān)鍵植物源化合物的篩選及應(yīng)用，更具體為大豆中對斜紋夜蛾成蟲具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)。

背景技術(shù)：

1、斜紋夜蛾屬鱗翅目夜蛾科，是一類重要的農(nóng)業(yè)害蟲，其食性雜，具有暴食性和遷移能力強等特點。斜紋夜蛾寄主在自然界分布廣泛。目前主要以化學(xué)防治控制該蟲危害，但這誘發(fā)了抗藥性、環(huán)境污染及農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留等問題，亟待研發(fā)生態(tài)防控措施。專利cn110692641a公開了一種防治斜紋夜蛾的新藥及其使用方法，所述新藥為環(huán)孢素a，所述斜紋夜蛾的2齡和3齡幼蟲取食環(huán)孢素的致死濃度為100-150μm；環(huán)孢素a作用于斜紋夜蛾，可能抑制了去磷酸化酶的活性，進而影響了昆蟲體內(nèi)抗菌肽和解毒酶的表達和活性；但該方法在實際大面積應(yīng)用中存在一些藥物成本、施藥方式等限制。專利cn104621172a公開了一種殺蟲蛋白的用途，將斜紋夜蛾害蟲至少與cry2ab蛋白接觸，通過植物體內(nèi)產(chǎn)生能夠殺死斜紋夜蛾的cry2ab蛋白來控制斜紋夜蛾害蟲；對植物進行全生育期、全植株的保護以防治斜紋夜蛾害蟲的侵害；不過，這種借助植物自身產(chǎn)生殺蟲蛋白的方式，可能面臨植物品種限制、蛋白表達穩(wěn)定性等挑戰(zhàn)。專利cn116606742a公開了一種草酸青霉菌，對斜紋夜蛾和煙青蟲均具有防效；但該微生物防治手段在田間復(fù)雜環(huán)境下，能否穩(wěn)定發(fā)揮作用，以及是否會對其他有益生物產(chǎn)生影響，還有待進一步研究和驗證。

2、利用植物揮發(fā)性物質(zhì)來引誘靶標害蟲，從而使害蟲遠離主栽作物，降低害蟲的危害，是一種安全、有效的方法。通常，來源于植物的揮發(fā)性次生代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)簡單，易于合成，且具有與環(huán)境兼容性好、對非靶標生物安全等優(yōu)點，是新型環(huán)保生物農(nóng)藥的研發(fā)方向之一。專利cn101940208a提供了一種引誘斜紋夜蛾的性信息素組合物及其誘芯，其組分包括：由順9反11-十四碳二烯乙酸酯和順9反12-十四碳二烯乙酸酯以3～13∶1的質(zhì)量比例混合組成的性信息素；另外增加有苯乙醛作為增效劑，其占總組分質(zhì)量的20～60％；該專利證明苯乙醛可提高斜紋夜蛾性信息素誘殺技術(shù)，解決了目前斜紋夜蛾因多次交配引起的防治效率不高問題，對斜紋夜蛾性誘害蟲防治和測報具有重要作用和意義。除了利用植物揮發(fā)性物質(zhì)增強性信息素的誘捕效果外，還可以研發(fā)直接針對雌成蟲的引誘劑，這種防治方法相比傳統(tǒng)的性誘雄蛾技術(shù)更為精準和高效，能夠顯著提升蟲害防治效果和監(jiān)測準確性。

3、發(fā)明人前期文獻報道了大豆是引誘綠葉菜上斜紋夜蛾的誘集植物(萬年峰,蔣杰賢,季香云.設(shè)施條件下青菜間作大豆或芋艿控制斜紋夜蛾效果及對捕食性天敵多樣性的影響[j].中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報,2012,20(2)：236-241)。在綠葉菜田周邊種植大豆引誘斜紋夜蛾，利用大豆間接調(diào)控綠葉菜上斜紋夜蛾。然而，這僅從生產(chǎn)應(yīng)用層面證明了大豆對斜紋夜蛾具有引誘效果，未能深究其引誘機理，更未能發(fā)現(xiàn)具有引誘作用的植物源揮發(fā)物種類。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、基于上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點，本技術(shù)的目的是提供大豆中對斜紋夜蛾成蟲具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)。發(fā)明人通過氣相色譜-觸角電位聯(lián)用技術(shù)(gc-ead)、觸角電位技術(shù)(eag)、行為實驗篩選對斜紋夜蛾成蟲具有引誘的關(guān)鍵植物源化合物，為研發(fā)斜紋夜蛾成蟲引誘劑、防治斜紋夜蛾提供理論基礎(chǔ)。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案之一，提供壬醛、葉醇和己醛在防治斜紋夜蛾成蟲中的應(yīng)用。所述壬醛、葉醇和己醛對斜紋夜雌成蟲均具有引誘作用；所述葉醇和己醛對斜紋夜雄成蟲具有引誘作用。

3、本發(fā)明的技術(shù)方案之二，提供一種斜紋夜蛾雌成蟲引誘劑，所述引誘劑的溶質(zhì)成分包括：壬醛、葉醇或己醛中的任一種或者任兩種；當引誘劑中含有2種溶質(zhì)成分時，所述引誘劑中壬醛、葉醇和己醛幾種成分之間的比例為壬醛：葉醇＝1：1、壬醛：己醛＝1：1或葉醇：己醛＝1：1中的任一種；所述溶質(zhì)在引誘劑中的濃度為(1～100)μg/μl。

4、進一步地，所述引誘劑的溶劑為二氯甲烷、石蠟油或正己烷中的至少任一種。

5、進一步地，所述引誘劑通過人工配制的方法得到，或者通過從天然植物中收集提取得到。

6、本發(fā)明的技術(shù)方案之三，提供一種斜紋夜蛾雄成蟲引誘劑，所述引誘劑的溶質(zhì)成分包括：葉醇、己醛中的至少任一種；當引誘劑中含有2種溶質(zhì)成分時，所述葉醇、己醛的比例為2：1～1：2，優(yōu)選為1：1、2：1或1：2中的任一種，最優(yōu)選為1：1；所述溶質(zhì)在引誘劑中的濃度為(1～100)μg/μl。

7、進一步地，所述引誘劑的溶劑為二氯甲烷、石蠟油或正己烷中的至少任一種；所述引誘劑通過人工配制的方法得到，或者通過從天然植物中收集提取得到。

8、本發(fā)明的技術(shù)方案之四，提供一種從大豆中提取對斜紋夜蛾成蟲具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)的方法。

9、進一步地，該方法基于一種大豆揮發(fā)物的收集裝置，所述裝置的結(jié)構(gòu)包括：

10、大氣采樣儀(1)、活性炭過濾瓶(2)、加濕錐形瓶(3)、第一流量計(4)、玻璃罩(5)、吸附管(6)、第二流量計(7)；以上結(jié)構(gòu)通過管路按次序順次連接，且第二流量計(7)與大氣采樣儀(1)連接，整個裝置形成循環(huán)且密閉的通路。所述玻璃罩(5)用于放置植物；所述吸附管(6)中放置有porapak-q吸附劑，用于采集植物揮發(fā)物樣品。

11、進一步地，所述方法基于上述收集裝置，步驟包括：

12、(1)測試前準備：淋洗玻璃罩并烘干，將玻璃罩瓶口密封后，持續(xù)通入空氣；用錫箔紙包裹種植大豆的栽盆上口并露出大豆植株，以消除土壤與花盆揮發(fā)物的影響；

13、(2)揮發(fā)物收集：打開大氣采樣儀，控制出氣口和進氣口的空氣流速相同，此時吸附管中的porapak-q吸附劑持續(xù)吸附大豆植株的揮發(fā)物，持續(xù)抽氣一段時間后，使用溶劑將吸附有揮發(fā)物的porapak-q吸附劑洗脫，得到的洗脫液中含有對斜紋夜蛾成蟲具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)，可以作為所述斜紋夜蛾雌成蟲引誘劑和/或斜紋夜蛾雄成蟲引誘劑。

14、步驟(1)中所述淋洗玻璃罩是指：先后用蒸餾水、無水酒精、丙酮淋洗玻璃罩；所述烘干是指：在180～220℃條件下烘烤1～3h，優(yōu)選為放入200℃烘箱烘烤2h；所述持續(xù)通入空氣的流速為150～400ml/min，優(yōu)選為200ml/min；

15、步驟(2)中所述出氣口和進氣口的空氣流速均為480～520ml/min，優(yōu)選為500ml/min；所述持續(xù)抽氣的時間為10～15小時，優(yōu)選為12小時；所述洗脫采用的洗脫劑/溶劑為二氯甲烷、石蠟油或正己烷中的任一種，優(yōu)選為二氯甲烷；所述洗脫劑/溶劑的體積為1～5ml，優(yōu)選為1.5ml。

16、本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：

17、(1)本發(fā)明首次在大豆的揮發(fā)成分中發(fā)現(xiàn)對斜紋夜蛾成蟲具有行為響應(yīng)的6種揮發(fā)物(己醛、反式-2-己烯醛、葉醇、乙酸葉醇酯、壬醛和異佛爾酮)，斜紋夜蛾成蟲對這6種化學(xué)物質(zhì)均有觸角電位反應(yīng)且具有強烈劑量依賴性，其中壬醛、葉醇、己醛對斜紋夜蛾雌成蟲有引誘效果，葉醇、己醛對斜紋夜蛾雄蟲有引誘效果。

18、(2)引誘劑中的壬醛和己醛體積比為1：1、壬醛和葉醇體積比為1：1時，對斜紋夜蛾雌蟲有引誘效果；引誘劑中的葉醇和己醛體積比為1：1時，對斜紋夜蛾雄蟲有顯著的引誘效果。

19、(3)本發(fā)明第一次發(fā)現(xiàn)大豆揮發(fā)物中壬醛、葉醇、己醛對斜紋夜蛾雌/雄蟲有引誘作用，這為下一步研發(fā)植物源害蟲引誘劑產(chǎn)品控制斜紋夜蛾雌成蟲奠定了基礎(chǔ)。