技術特征：

1.一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，步驟s1中所述永生化間充質(zhì)干細胞的構(gòu)建包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，步驟s3中所述工程化凋亡細胞外囊泡膜的提取方法包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，步驟s33中所述離心處理條件為：

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，步驟s34中所述超聲處理條件為：功率40w，脈沖周期開6s、關3s，持續(xù)時間6min；所述離心處理條件為：超聲處理的溶液先在3200g條件下離心5min，收集上清液四；將上清液四在20000g條件下離心20min，獲得沉淀物為工程化凋亡細胞外囊泡膜。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，步驟s4中所述線粒體與工程化凋亡細胞外囊泡膜混合的質(zhì)量比例為1:1。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種工程化線粒體的制備方法，其特征在于，步驟s4中所述超聲處理條件為：功率40w，脈沖周期開2s、關3s，持續(xù)時間為2min；所述離心處理條件為：12000g離心5min。

8.一種根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述工程化線粒體的制備方法制備得到的工程化線粒體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的工程化線粒體，其特征在于，所述工程化線粒體的粒徑為200-500nm。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的工程化線粒體在制備用于調(diào)控巨噬細胞免疫和代謝的藥物中的應用。

技術總結(jié)
本發(fā)明公開了一種工程化線粒體及其制備方法與應用，其中工程化線粒體的制備方法包括：構(gòu)建永生化間充質(zhì)干細胞；從永生化間充質(zhì)干細胞中分離提取線粒體；取永生化間充質(zhì)干細胞經(jīng)IFN?γ和TNF?α預處理，凋亡誘導，提取得到工程化凋亡細胞外囊泡膜；將線粒體與工程化凋亡細胞外囊泡膜混合，經(jīng)超聲、離心后，獲得表面包覆工程化凋亡細胞外囊泡膜的工程化線粒體；有效提升了工程化線粒體的穩(wěn)定性與靶向性，不僅解決了線粒體直接移植時細胞攝取效率低的問題，還增強了線粒體在受損細胞中的功能恢復效果，為工程化線粒體移植治療提供了更為高效、穩(wěn)定的線粒體來源。

技術研發(fā)人員：徐祥,楊國梅,姚孟維,敖羅權(quán),胡鋮益,吳曉鳳,申沛鑫
受保護的技術使用者：中國人民解放軍陸軍特色醫(yī)學中心
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/6/30